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破解手性色譜柱難題:從溶劑互溶性入手

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時(shí)間:2024-09-12
在使用手性色譜柱的過(guò)程中,溶劑互溶性是一個(gè)不應(yīng)被忽視的重要因素。溶劑互溶性不僅關(guān)系到色譜柱的分離效果,還可能直接影響色譜柱的壽命和穩(wěn)定性。

在使用手性色譜柱的過(guò)程中,溶劑互溶性是一個(gè)不應(yīng)被忽視的重要因素。溶劑互溶性不僅關(guān)系到色譜柱的分離效果,還可能直接影響色譜柱的壽命和穩(wěn)定性。以下是在使用手性色譜柱時(shí)需要注意的溶劑互溶性方面的幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn):



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溶劑互溶性影響


  • 分離效果

理想的液體混合物是兩個(gè)純液體可按任意比例互溶,通常兩者結(jié)構(gòu)相似或極性相似,但實(shí)際上,常用的液相流動(dòng)相的互溶性會(huì)存在偏差,兩溶劑間的相互兼容性越好,它們混合所形成的溶解混合物溶解度指數(shù)也就越高,因此溶劑互溶性的好壞直接影響到色譜柱的分離效果。如果流動(dòng)相與固定相或樣品中的溶劑互溶性不佳,可能會(huì)導(dǎo)致色譜峰拖尾、分離度下降等問(wèn)題。



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    常見(jiàn)溶劑互溶表



      • 色譜柱壽命

      長(zhǎng)期使用與固定相不相容的溶劑,可能會(huì)逐漸侵蝕固定相的表面,導(dǎo)致色譜柱的分離性能下降,甚至損壞色譜柱。



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    02

    溶劑選擇


    • 樣品溶解溶劑

    樣品溶解:樣品一般用合適的流動(dòng)相溶劑溶解,以避免使用可能破壞手性固定相的溶劑。如果樣品中原本含有強(qiáng)溶劑,應(yīng)在進(jìn)樣前進(jìn)行充分的干燥或置換處理。



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    • 流動(dòng)相的選擇 

     非極性烷烴和醇類(lèi)溶劑:對(duì)于涂覆型手性固定相,建議使用非極性烷烴(如正己烷)和醇類(lèi)(如異丙醇或乙醇)作為流動(dòng)相的主要成分。這些溶劑通常與固定相具有較好的相容性,能夠保持色譜柱的穩(wěn)定性和分離效果。




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    避免強(qiáng)溶劑:涂覆型手性固定相特別敏感于某些強(qiáng)溶劑,如氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯以及丙酮等。這些溶劑可能會(huì)溶解或溶脹多糖衍生物等固定相材料,從而破壞固定相的結(jié)構(gòu)和性能。因此,在選擇流動(dòng)相時(shí),應(yīng)盡量避免使用這些強(qiáng)溶劑。

    鍵合型色譜柱無(wú)溶劑使用限制,如丙酮、氯仿、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙酸乙酯、二氯甲烷和四氫呋喃等強(qiáng)溶劑,均可作為溶劑溶解樣品和流動(dòng)相使用。




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    • pH的調(diào)節(jié)

    溶劑和溶質(zhì)的酸堿性質(zhì)是決定它們能否互溶的關(guān)鍵因素之一。通過(guò)調(diào)整pH值,可以改變?nèi)軇┗蛉苜|(zhì)的電離狀態(tài),從而影響其極性和溶解性。在某些情況下,通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值可以改變目標(biāo)化合物與固定相之間的相互作用力,提高分離效果。例如,在分離氨基酸等兩性化合物時(shí),常采用低pH值的流動(dòng)相以抑制酸性基團(tuán)的離子化并增強(qiáng)氨基的質(zhì)子化。




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    03

    操作建議


    • 樣品處理:

    在進(jìn)樣前,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行充分的預(yù)處理,以去除可能干擾分離效果的雜質(zhì)和溶劑殘留。

    • 溶劑篩選:

    在確定色譜柱和樣品后,應(yīng)首先進(jìn)行溶劑篩選實(shí)驗(yàn),以找到與固定相和樣品均相容的流動(dòng)相溶劑。這可以通過(guò)嘗試不同的溶劑組合和比例來(lái)實(shí)現(xiàn)。

    • pH調(diào)節(jié):

    在實(shí)際操作中,可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證不同pH值下溶劑對(duì)溶質(zhì)的溶解效果。通過(guò)改變?nèi)軇┑膒H值并觀察溶質(zhì)的溶解情況,可以找到最佳的pH值范圍。

    • 定期維護(hù):

    定期對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗和維護(hù),以去除可能積累的雜質(zhì)和殘留溶劑。這有助于保持色譜柱的分離性能和延長(zhǎng)其使用壽命。



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    總結(jié)

    溶劑互溶性是使用手性色譜柱時(shí)需要注意的一個(gè)重要因素。通過(guò)合理選擇流動(dòng)相溶劑、pH的調(diào)節(jié)以及定期維護(hù)色譜柱等措施,可以確保色譜柱的穩(wěn)定性和分離效果。同時(shí),在操作過(guò)程中還應(yīng)注意觀察色譜圖的變化情況,及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決問(wèn)題。


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