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NH2氨基色譜柱的使用與清潔方法

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時間:2024-12-11
需要注意的是,NH2氨基色譜柱的氨丙基鍵合官能團(tuán)較C18和C8柱的鍵合官能團(tuán)更容易發(fā)生水解。因此,在使用時應(yīng)做好其使用壽命可能較短的心理準(zhǔn)備,特別是在反相條件下使用時。

NH2氨基色譜柱的應(yīng)用:


需要注意的是,NH2氨基色譜柱的氨丙基鍵合官能團(tuán)較C18和C8柱的鍵合官能團(tuán)更容易發(fā)生水解。因此,在使用時應(yīng)做好其使用壽命可能較短的心理準(zhǔn)備,特別是在反相條件下使用時。


在反相條件下使用時,需特別關(guān)注PH值的控制。PH值越低,發(fā)生水解的風(fēng)險就越大;流動相中水的比例越高,同樣增加了水解的可能性。因此,在使用后以及準(zhǔn)備長時間存放該柱時,進(jìn)行必要的清洗并將氨基柱保存在純凈的有機溶劑中是很好的維護(hù)措施。


在使用NH2氨基色譜柱分析酸性物質(zhì)如果汁中的糖分時,酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,這可能導(dǎo)致略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)發(fā)生質(zhì)子化。這樣一來,經(jīng)過一段時間的使用后,某些分析物的保留特性可能會發(fā)生變化,或者表現(xiàn)為柱效的下降。

NH2氨基色譜柱的清潔方法


1、平時在正常狀態(tài)下使用:


首先用50倍柱體積的異丙醇進(jìn)行清洗,由于異丙醇的粘度較高,需適當(dāng)降低流速;接著,再用50倍的甲醇進(jìn)行清洗;最后,通過異丙醇過渡回常用的正相流動相即可。


2、通常在反相條件下使用:


緩沖鹽需及時沖洗,切勿直接用純甲醇進(jìn)行沖洗。這是常識,因此不需要特別說明。


用50倍的純甲醇進(jìn)行沖洗;隨后,使用異丙醇進(jìn)行過渡,再用二氯甲烷清洗色譜柱;最后,再用異丙醇過渡回甲醇條件。

除此之外,對于經(jīng)常分析極性較強樣品(如糖類、氨基酸等)的NH2氨基色譜柱,還需要定期進(jìn)行深度清潔,以去除可能吸附在柱內(nèi)的雜質(zhì)。深度清潔步驟如下:首先,使用50倍柱體積的5%乙酸乙酯的甲醇溶液進(jìn)行清洗,這一步可以有效去除極性雜質(zhì);然后,再用50倍的純甲醇沖洗;接著,通過異丙醇過渡到二氯甲烷進(jìn)行深度脫水;最后,用異丙醇再次過渡回甲醇,并至少用20倍柱體積的甲醇平衡柱子,以確保柱子狀態(tài)穩(wěn)定。


在清潔過程中,務(wù)必注意流速的控制,避免過高的流速對柱子造成損傷。同時,每次清洗后都應(yīng)檢查柱壓,確保柱子的通暢性。清潔完成后,應(yīng)將NH2氨基色譜柱保存在純凈的有機溶劑中,并置于陰涼干燥處,以延長其使用壽命。


總之,NH2氨基色譜柱的維護(hù)與清潔是保證其分析性能的重要環(huán)節(jié)。只有嚴(yán)格按照規(guī)定的方法進(jìn)行操作和維護(hù),才能確保柱子的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性,為科研和生產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)支持。


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