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C18反相液相色譜柱的維護(hù)及操作步驟

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時(shí)間:2024-12-20
c18反相液相色譜柱在測試后應(yīng)儲存在乙腈和水的混合溶液中。新柱使用前需用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈進(jìn)行沖洗。務(wù)必確保分析樣品所用的流動相與乙腈/水能夠互溶。每天要花足夠的時(shí)間用流動相來平衡c18反相液相色譜柱。

C18反相液相色譜柱的保養(yǎng)與維護(hù)


1.C18反相液相色譜柱的平衡過程


c18反相液相色譜柱在測試后應(yīng)儲存在乙腈和水的混合溶液中。新柱使用前需用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈進(jìn)行沖洗。務(wù)必確保分析樣品所用的流動相與乙腈/水能夠互溶。每天要花足夠的時(shí)間用流動相來平衡c18反相液相色譜柱。


C18反相液相色譜柱的操作步驟如下:


a.在平衡開始時(shí),逐漸提高流速,用流動相對色譜柱進(jìn)行平衡,直到得到穩(wěn)定的基線(如果緩沖鹽或離子對試劑的流速較低,平衡所需的時(shí)間可能會更長)。


b.如果流動相中含有緩沖鹽,則需要注意用純水進(jìn)行過渡。在每天的分析開始之前,必須先用純水沖洗30分鐘以上,然后再用含緩沖鹽的流動相進(jìn)行平衡;分析結(jié)束后,也必須先用純水沖洗30分鐘以上,以去除緩沖鹽,然后再用甲醇沖洗30分鐘,以保護(hù)柱子。

2.C18反相液相色譜柱的恢復(fù)


長期使用的C18反相液相色譜柱,通常會導(dǎo)致柱效下降(理論塔板數(shù)減少)??梢詫18反相液相色譜柱進(jìn)行再生,建議在具備條件的實(shí)驗(yàn)室中,使用一臺經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的泵進(jìn)行柱子的再生處理。


具體再生步驟如下:首先,用高濃度的有機(jī)溶劑(如純甲醇或乙腈)以較低流速沖洗柱子數(shù)小時(shí),以去除可能積累的雜質(zhì)和污染物。隨后,改用一種溫和的酸性或堿性溶液(如0.1M的磷酸或氫氧化鈉溶液,需根據(jù)柱子耐受性選擇),同樣以低流速沖洗數(shù)小時(shí),這一步旨在中和并去除可能吸附在柱子表面的殘留物。完成酸堿處理后,務(wù)必再次用高濃度有機(jī)溶劑沖洗,徹底洗凈酸堿殘留,恢復(fù)柱子至中性環(huán)境。


此外,定期進(jìn)行反向沖洗也是保持柱子性能的有效手段,但需注意不是所有柱子都支持此操作,操作前務(wù)必查閱柱子說明書。反向沖洗時(shí),使用與常規(guī)方向相反的流動相,以輕微松動并去除柱內(nèi)可能堵塞的顆粒。


最后,每次使用完畢后,除了上述的沖洗步驟,還應(yīng)確保色譜柱內(nèi)充滿適宜的保存溶劑,并存放在陰涼干燥處,避免溫度和濕度的劇烈變化,這些都能有效延長C18反相液相色譜柱的使用壽命,確保其持續(xù)提供高質(zhì)量的分離效果。


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