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HPLC分離度不夠?7大實用技巧幫你輕松搞定!

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時間:2025-03-03
在高效液相色譜(HPLC)分析中,目標(biāo)峰分離度不足是實驗室常見的“頭疼問題”。分離度差不僅影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性,還可能導(dǎo)致結(jié)果誤判!別擔(dān)心,本文總結(jié)了7大核心解決方案,從流動相優(yōu)化到儀器維護,手把手教你拯救重疊峰!

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為什么分離度不夠?先找原因!


分離度(Resolution, Rs)是衡量色譜峰分離效果的核心指標(biāo),通常要求Rs≥1.5。當(dāng)Rs不足時,可能是以下原因?qū)е拢?/p>


  • 色譜柱性能下降(柱效低、填料污染)

  • 流動相選擇不當(dāng)(pH、有機相比例、添加劑不匹配)

  • 方法參數(shù)不合理(流速、溫度、梯度程序)

  • 樣品過載或基質(zhì)干擾





7大解決方案,總有一招適合你!



1. 流動相:從“配方”入手提升選擇性

  • 調(diào)整有機相比例
    增加乙腈/甲醇比例可縮短保留時間,反之延長。通過微調(diào)比例(如±5%),拉開目標(biāo)峰與干擾峰的間距。

  • 精準(zhǔn)控制pH值(針對可電離化合物):
    酸性物質(zhì):降低pH抑制電離,增強保留;
    堿性物質(zhì):升高pH促進電離,改善分離。

  • 巧用添加劑
    添加離子對試劑(如0.1%三氟乙酸)或緩沖鹽(如磷酸鹽),增強極性化合物分離。

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